紫茎泽兰褐斑病的诊断鉴定及病原菌的主要生物学特性研究

【摘要】紫茎泽兰(EupatoriumadenophorumSpreng)原产于南美洲的墨西哥至哥斯达黎加一带,自20世纪40年代传入我国云南省,现已在我国云南、广西、贵州、重庆等西南大部分地区广泛分布,成为当地一种难以根除的恶性杂草,严重危害的了当地的农牧业生产及生态平衡。我国对紫茎泽兰的防治方法主要有化学防治、人工及物理防除和生物防治,其中生物防治被认为是一种对环境安全且可持续性高的防治方法,具有很高的防治潜力。本研究对采自重庆市的紫茎泽兰发病植株进行了病原菌的分离培养、形态学及分子生物学鉴定,主要生物学特性的测定,以及病原菌对主要农作物的安全性测定。紫茎泽兰褐斑病的主要症状及病原菌的分离：采集的紫茎泽兰发病植株均为叶发病,病斑生于叶片正面和背面,近圆形或多角形,外缘呈浅褐色,中部呈黑褐色,浸渍状。通过常规组织分离和柯赫式证病律获得8个致病菌株,其中,ZD014菌株致病性最强,具有生防应用潜力。本研究对其进行了较详细的研究,主要包括病害症状调查和描述、病原菌的分类鉴定及其生物学特性分析。病原菌ZD014菌株的形态学特征：在燕麦片(OA)培养基上培养,菌落圆形,边缘规则,气生菌丝少,具少量绒毛状菌丝,偶有墨绿色扇形区域NaOH测试呈黄色；镜检观察其分生孢子器黑褐色,球形或近球形,埋生或半埋生于培养基中,器壁厚；分生孢子单细胞,无色透明,长椭圆形或棍棒状,具有两个明显的油球；分生孢子大小为3-7μmX2-3μm依据ZD014菌株的形态特征,参考相关资料将病原菌初步鉴定为茎点霉属(Phomasp.).ZD014菌株的分子鉴定：通过聚合酶链式反应(PCR)对ZD014核糖体DNA内转录间隔区(rDNA-ITS)的特异性扩增,得到了长度约为570bp的特异性片段,BLAST比对后,明确该菌的有性时期属于亚隔孢壳属(Didymellasp.).ZD014菌株的主要生物学特性：适合该菌菌落生长的培养基有马铃薯培养基(PDA)和胡萝卜培养基(CAA)；最适生长温度为25℃；该菌在pH为3.0-12.0的范围内均可生长,最适pH为6.0；光照能促进菌落的生长。ZD014在玉米培养基(CMA)上产孢量最大；在20℃培养时适宜产孢;最适产孢的pH为7.0-8.0；光照对产孢具有促进作用。ZD014菌株寄主范围的测定：本研究通过病原菌对禾本科的玉米、小麦;茄科的番茄、辣椒、茄子；十字花科的白菜、甘蓝、油菜、萝卜,豆科的四季豆、豇豆,葫芦科的黄瓜、南瓜,菊科的莴笋、菊花、紫茎泽兰等6个科16种常见作物进行致病性测定,明确其寄主范围。接种15d后观察,在紫茎泽兰上观察到严重的褐斑病症状,而在其余供试植物上没有观察到病害症状,且植株的生长与相应的未接种对照植株没有明显差异。这表明该病原菌对主要作物具有很好的安全性。因此,ZD014具有潜在的生防应用潜力和开发价值。紫茎泽兰褐斑病是国内外尚未报道的一种新植物病害,通过形态学和分子生物学方法鉴定,结合病害症状和柯赫氏证病试验结果,表明该病害的病原菌为一种茎点霉(Phomasp.)其有性时期为亚隔孢壳属(Didymellasp.)真菌。此病原菌对紫茎泽兰的致病性很强,而对常见农作物不致病,所以在紫茎泽兰的生物防治中具有潜在的开发应用价值。
【作者】严加林；
【导师】谭万忠；
【作者基本信息】西南大学，植物病理学，2014，硕士
【关键词】紫茎泽兰；褐斑病；茎点霉；致病性；生物学特性；安全测定；

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